葉綠素計是通過測量葉片在兩種波長范圍內(nèi)的透光系數(shù)來確定葉片當前葉綠素的相對數(shù)量,也就是在葉綠素選擇吸收特定波長光的兩個波長區(qū)域,根據(jù)葉片透射光的量來計算測量值的。通過葉片透光程度快速的測量植物的葉綠素相對含量或“綠色程度”。植物葉片中的葉綠素含量反映了植物本身的光合能力和健康狀況,長勢良好的植物的葉子會含有更多的葉綠素。葉綠素的含量與葉片中氮的含量有很密切的關系,因而葉綠素測量值還能說明植物真實的硝基需求量,通過這種儀器有利于合理施加氮肥,提高氮的利用率,并可保護環(huán)境不會因為氮肥使用過度而受到污染。
它的原理就是根據(jù)葉綠體色素提取液對可見光譜的吸收,利用分光光度計在某一特定波長測定其吸光度,即可用公式計算出提取液中的各種色素的含量。某有色溶液的吸光度A與其中溶質濃度C和液層厚度L成正比,即A=αCL式中:α比例常數(shù)。當溶液濃度以百分濃度為單位,液層厚度為1cm時,α為該物質的吸光系數(shù)。各種有色物質溶液在不同波長下的吸光系數(shù)可通過測定已知濃度的純物質在不同波長下的吸光度而求得。如果溶液中含有數(shù)種吸收光物質,那么此混合液在某一波長下的總吸光度等于各組分在相應波長下吸光度的總和,這就是吸光度的加和性。如果想要測定葉綠體色素混合提取液中葉綠素a、b和類胡蘿卜素的含量,那么就只需要測定該提取液在三個特定波長下的吸光度A,并且根據(jù)葉綠素a、b及類胡蘿卜素在該波長下的吸光系數(shù)即可求出其濃度。在使用葉綠素計測定葉綠素a、b時,為了排除類胡蘿卜素的干擾,所用單色光的波長選擇葉綠素在紅光區(qū)的吸收峰。
本儀器用起來并不麻煩,因為它體積較為小巧,所以,可以將其隨身攜帶到野外進行活體檢測,即使是狹小的葉片,利用該儀器檢測起來也是毫不費力的。檢測時要先校準,校準完成后再進行檢測,檢測時,要保證葉片覆蓋接收窗,不要測定過厚的樣品,比如說葉脈,如果測定的葉片葉脈較多,則需要多次檢測求平均值。要避免陽光直射,影響測量結果,保證發(fā)射窗和接收窗的干凈,關閉測量頭,按指壓臺直到聽到“嗶”聲,測量結果會顯示在屏幕上,并自動存儲。而且它的優(yōu)點也很多,其中一點就是可以實現(xiàn)作物活體檢測,這樣就可有效解決葉綠素降低問題,而且活體檢測不會影響到植物的正常生長,適合大范圍的測定工作。利用該儀器測定植物葉片中的葉綠素含量也是非常方便的,將儀器調(diào)零,之后將葉片放入測量頭部,關閉測量頭,按指壓臺聽到一聲向后,即可測試出葉綠素含量,葉綠素計測試的過程非常的簡單也非常的快。